ผลของสารสกัดหยาบเอทานอลจากใบมะรุม (Moringa oleifera Lam.) ต่อการยับยั้งการแสดงออกของโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 ในเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิด K562

Abstract

Introduction: Natural products have been studied for an alternative leukemia treatment. The Moringa oleifera Lam. has been reported to mediate chemo-preventive effects by enhancing antioxidant status. However, cytotoxicity of Moringa oleifera Lam. extract has not been reported yet in leukemic cell lines. Objective: To study anti-leukemic properties of Moringa oleifera Lam. leave extract in K562 cell line. Materials and methods: Cytotoxicity of crude Moringa oleifera Lam. leave extract was determined by MTT assay. The WT1 protein level were examined by Western blot analysis. All data was analyzed statistically by one-way ANOVA. Results: Crude ethanolic extract of Moringa oleifera Lam. leaves exhibited distinctly cytotoxic effect on K562 cells with IC50 of 220±22 μg/mL and non-cytotoxic dose (IC20) of 55±5 μg/mL. Result also showed that WT1 protein level after treated with crude ethanolic Moringa oleifera Lam. leave extract, in various incubation time (24, 48, and72 hours), were decreased by 21, 37, and 61% respectively. In addition, at 48 hours of incubation with various concentrations (45, 55, and 65 μg/mL) WT1 protein reduced by 32, 48, and 68% respectively. However, crude Moringa oleifera Lam. leave extract at IC20 clearly showed that it did not affect cell morphology. Importantly, crude ethanolic Moringa oleifera leave extract did not affect PBMCs (576.9 μg/mL). Conclusion: Crude ethanolic Moringa oleifera Lam. leave extract could inhibit cell proliferation and reduce WT1 protein level in a dose- and time-dependent manner. Therefore, it can be concluded that crude Moringa oleifera Lam. leave extract involved in down-regulation of translational process of WT1 protein expression in K562 cells. These results indicated that Moringa oleifera Lam. leave extract could be a promising plant that should be further on studied as an alternative choice for leukemia treatment.

บทนำ: ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติถูกศึกษาเพื่อทางเลือกใหม่รักษามะเร็งเม็ดเลือดขาว มีรายงานว่ามะรุมสามารถป้องกันมะเร็งโดยออกฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ แต่ยังไม่มีรายงานความเป็นพิษของสารสกัดมะรุมกับเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวมาก่อนวัตถุประสงค์: เพื่อศึกษาฤทธิ์ต้านมะเร็งเม็ดเลือดขาวของสารสกัดใบมะรุมต่อเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิด K562 วิธีการ: ศึกษาความเป็นพิษของสารสกัดหยาบใบมะรุมด้วยวิธี MTT และการตรวจระดับโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 โดยวิธี Western blot วิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติโดย One-way ANOVA ผลการทดสอบ: สารสกัดหยาบเอทานอลใบมะรุมมีความเป็นพิษต่อเซลล์ K562 โดยยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ร้อยละ 50 (IC50) เท่ากับ 220±22 μg/mL และความเข้มข้นที่ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ (IC20) เท่ากับ 55±5 μg/mL พบว่าเมื่อเลี้ยงเซลล์ร่วมกับสารสกัดหยาบใบมะรุมเป็นระยะเวลา 24, 48 และ 72 ชั่วโมง การแสดงออกของโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 ลดลงร้อยละ 21, 37 และ 61 ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบว่าที่ 48 ชั่วโมง ความเข้มข้นสารสกัดหยาบที่ 45, 55, และ 65 μg/mL สามารถลดระดับโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 ได้ร้อยละ 32, 48 และ 68 ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม สารสกัดหยาบใบมะรุมที่ความเข้มข้น IC20 ไม่มีผลกระทบต่อลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ และที่สำคัญสารสกัดหยาบเอทานอลใบมะรุม ไม่มีผลกระทบต่อเซลล์เม็ดเลือดขาวนิวเคลียสเดี่ยวคนปกติ (576.9 μg/mL) สรุป: สารสกัดหยาบเอทานอลใบมะรุมสามารถยับยั้งการเจริญเติบโตและลดปริมาณของโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 ตามระยะเวลาและความเข้มข้นที่เพิ่มสูงขึ้น กล่าวได้ว่าสารสกัดหยาบใบมะรุมอาจเกี่ยวข้องกับการควบคุมการแสดงออกออกของโปรตีนวิล์มทูเมอร์ 1 ในเซลล์ K562 จากผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าสารสกัดหยาบใบมะรุมมีแนวโน้มที่จะใช้เป็นอีกทางเลือกหนึ่งของการรักษาโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว