การวินิจฉัยอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 (SEA-type) อย่างง่ายด้วยวิธีพีซีอาร์โดยการใช้ cell lysate จากเลือดครบส่วน

Abstract

การศึกษาครั้งนี้มีวัดถุประสงค์เพื่อตรวจหายีนอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 ชนิด SEA-type ซึ่งเป็นความผิดปกติทางพันธุกรรมที่พบมากในประชากรภูมิภาดนี้และทำให้เกิดโรดอัลฟาธาลัสซีเมียที่มีอาการรุนแรง (ฮีโมโกล บินบาร์ทไฮตรอฟฟิทัลลิส ชินโตรม) ด้วยวิธีพีซีอาร์ที่รวดเร็ว โดยการใช้ DNA ใน cell lysate ที่เตรียมจากเลือดรวมซึ่งไช้อีดีทีเอ เป็นสารกันเลือดแข็งและตรวจคัดกรองธาลัสซีเมียโดยวิธี KKU-OF test โดย 25 รายให้ผลบวกต่อ KKU-OF test และ 25 รายให้ผลลบต่อ KKU-OF test การศึกษาประสบความสำเร็จในการตรวจยืนอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 โดยการไช้ cell lysate จากเลือตรวมด้วยวิธีพีซีอาร์ ซึ่งในกลุ่ม 25 รายที่ให้ผลบวกกับ KKU-0F test ตรวจพบ 4 รายเป็นพาหะอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 ส่วนในกลุ่ม 25 รายที่ให้ผลลบกับ KKU-OF test ตรวจไม่พบยืนอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 การเตรียม cell lysate จากเลือดรวมร่วมกับการใช้ KKU-OF test สามารถใช้เป็นทางเลือกเพื่อใช้ในการตรวจวินิจฉัยหายีนอัลฟาธาลัสซีเมีย 1 ซึ่งจะช่วยในการกวบคุมและป้องกันการเกิดโรด ฮีโมโกลบินบาร์ทไฮดรอฟฟิทัลลิส ซึ่งพบมากในประชากรของภูมิภาคนี้ให้ได้ผลดียิ่งขึ้นต่อไป

In order to provide a rapid method for identifying a-thalassemia 1 (SEA-type) in a region where this disorder is common and can lead to severe a-thalassemia (Hb Bart's hydrops fetalis syndrome). In this study, the detection of a-thalassemia 1 (SEA-type) were performed by PCR using the DNA prepared from whole blood cell lysate. The whole blood samples stored in EDTA were collected from 25 Thai adults who were positive for screening with KKU-OF test and 25 who were negative for this test. A successful identification of the a-thalassemia 1 of SEA deletion using the direct PCR on cell lysate was demonstrated. The result showed that, among those positives for KKU-OF test, 4 were a-thalassemia 1 (SEA-type) heterozygote. In contrast no a-thalassemia 1 (SEA-type) was detected in the KKU-OF negative group. Combination of a direct PCR analysis on whole blood cell lysate and KKU-OF test would therefore provide a screening alternative for a-thalassemia 1 (SEA- type) in the regions where a program of prevention and control of the Hb Bart's hydrops fetalis syndrome is supplemented.