สภาวะที่เหมาะสมสำหรับการงอกของสปอร์และความไวต่อสภาวะเครียดของ Talaromyces marneffei

Abstract

การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการงอกของสปอร์และการทดสอบความไวต่อความเครียดของ Talaromycesmarneffei ผลการทดสอบพบว่าเมื่อบ่มที่สภาวะอุณภูมิ 25องศาเซลเซียส พบการงอกของสปอร์ได้ดีกว่าสภาวะที่ 37องศาเซลเซียส ซึ่งอัตราการงอกจะคงที่เมื่อบ่มนาน 16 และ 20 ชั่วโมง เท่ากับร้อยละ 99.7และ 72.7 ตามลำดับ การทดสอบหาความเข้มข้นในระดับที่มากที่สุดที่ยังไม่ทำให้จุลชีพตาย หรือ sublethal dose ในสภาวะราสายและยีสต์พบว่าสารที่มี sublethal dose เท่ากันในทั้ง 2 สภาวะประกอบด้วย แคลเซียมคลอไรด์ 200 มิลลิโมลาร์ โซเดียมคลอไรด์ 0.5 โมลาร์ น้ำตาลซอร์บิทอล 0.75 โมลาร์ menadione 62.5 ไมโครโมลาร์ ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 2.5 มิลลิโมลาร์ และ sodium dodecyl sulphate (SDS) ร้อยละ 0.005 ยกเว้นสาร t-butyl hydroperoxide(t-BOOH) ซึ่งพบว่าในสภาวะที่เป็นราสายจะใช้ความเข้มข้นสูงกว่าสภาวะยีสต์ คือ 1.5 และ 0.5 มิลลิโมลาร์ ตามลำดับ จากผลการศึกษาสภาวะที่เหมาะสมที่ได้นี้สามารถนำไปประยุกต์ใช้ทดสอบความไวของจุลชีพสายพันธุ์ปกติเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ของ T. marneffei ได้

This study aims to investigate the optimal conditions for spore germination and susceptibility to stress of Talaromyces marneffei. The results revealed that an incubation temperature of 25oC was more favorable for spore germination than at 37oC.The germination rate was found to be constant between 16 and 20 hours at either temperature; 25oC yielded 99.7 germination, while 37oC showed 72.7% germination. To simulate stress response, the highest dose concentration of several compounds found to be insufficient to cause death (sublethal dose) was determined in both mycelium and yeast phases. Both phases of T. marneffei were found to have the following sublethal dose tolerance rates: CaCl2(200 mM), NaCl (0.5M), sorbitol (0.75M), menadione (62.5 μM), H2O2(2.5 mM), and sodium dodecyl sulphate (SDS, 0.005 %). Meanwhile, the sublethal dose of t-butyl hydroperoxide (t-BOOH) in mycelium and yeast phases were 1.5 and 0.5mM, respectively. The results of this optimal conditions study could be further applied for fungal stress susceptibility testing comparing wild type and mutant strains of T. marneffei.