การตรวจหายีนที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ Carbapenemase ในเชื้อกลุ่ม Enterobacteriaceae ที่แยกได้จากผู้ป่วยในโรงพยาบาลพระมงกุฎเกล้า

Abstract

เชื้อดื้อยาต้านจุลชีพ carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) เป็นปัญหาที่สำคัญในประเทศไทยและระดับนานาชาติที่มีแนวโน้มเพิ่มสูงขึ้น โดยกลไกการดื้อยาที่สำคัญ คือ การสร้างเอนไซม์ carbapenemase ดังนั้นการศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจหายีนที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ carbapenemase โดยเก็บตัวอย่างเชื้อ Enterobacteriaceae จากผู้ป่วยของโรงพยาบาลพระมงกุฎเกล้า ระหว่างเดือนมิถุนายน – ตุลาคม พ.ศ.2556 จำนวน 2,387 สายพันธุ์ ทำการทดสอบความไวต่อยา Ertapenem พบเชื้อที่ไม่ไวต่อยา จำนวน 28 สายพันธุ์ คิดเป็นร้อยละ 1.2 โดยมีค่า MICs ของเชื้อต่อยา Ertapenem อยู่ในช่วง 0.75 - >32 µg/ml, Meropenem 0.25 - >32 µg/ml และ Imipenem 0.19 - >32 µg/ml เมื่อทำการตรวจด้วยวิธี Modified Hodge test ให้ผลบวกทั้งหมด โดยตรวจพบการสร้างเอนไซม์ metallo-beta-lactamases ด้วยวิธี Imipenem-EDTA double disk synergy test จำนวน 18 ตัวอย่าง คิดเป็นร้อยละ 64.3 ผลการตรวจหายีนดื้อยา ด้วยวิธี Multiplex PCR สามารถตรวจพบ blaNDM-1, blaOXA-48 และ blaVIM ในเชื้อจำนวน 13 สายพันธุ์ ได้แก่ Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Enterobacter cloacae และ Providencia spp. และไม่พบ blaIMP, blaSPM. blaSIM, blaGIM และ blaKPC ในตัวอย่างที่นำมาศึกษานี้ งานวิจัยนี้จะเป็นข้อมูลเพื่อให้ทราบถึงกลไกในการดื้อยาของเชื้อในกลุ่ม CRE ทั้งยังเป็นข้อมูลในการเลือกยาที่เหมาะสมในการรักษาผู้ป่วย รวมถึงการเฝ้าระวังและควบคุมการแพร่ระบาดของเชื้อดื้อยาในกลุ่ม CRE

The emergence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) is an important problem to global health, including in Thailand. The resistant is mechanism mediated by producing carbapenemhydrolysing beta-lactamase (carbapenemases). The purpose of this study was to detect carbapenemases in clinical isolates of Enterobacteriaceae collected from patients in Phramongkutklao hospital between June and October 2013. A total of 2,387 Enterobacteriaceae isolates were screened for the presence of carbapenemases by disc diffusion test. The twenty eight (1.2%) isolations were screened positive and and the MICs range of these isolates for Ertapenem, Meropenem and Imipenem were 0.75 - >32 µg/ml ,0.25 - >32 µg/ml and 0.19 - >32 µg/ml respectively. The phenotypic results revealed that all isolates were Modified Hodge test positive, whereas 18 (64.3%) exhibited metallo-beta-lactamases activity by Imipenem-EDTA double disk synergy test. Multiplex PCR analysis for carbapenemase-encoding genes showed 13 isolates harboured blaNDM-1, blaOXA-48 and blaVIM in Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Enterobacter cloacae and Providencia spp. However blaIMP, blaSPM. blaSIM, blaGIM and blaKPC were not found in this study. The finding in this study may provide the current information for selection the appropriate antimicrobial therapy and the useful knowledge of antibiotic resistant mechanism of CRE as well as for infection control to prevent the dissemination of these resistant strains in the hospital.