การศึกษา variant ของยีน CD36 ในผู้บริจาคโลหิตไทยของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย

Abstract

วัตถุประสงค์ การศึกษานี้ได้ทำการตรวจฟีโนไทป์ของ CD36 (Nak[superscript a]) และศึกษาชนิด variant ของยีน CD36 ในผู้บริจาคเกล็ดโลหิตของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาตติ สภากาชาดไทย เพื่อใช้เป็นข้อมูลเบื้องต้นในการศึกษาความสำคัญทางคลินิก และพัฒนาชุดตรวจด้วยเทคนิคอื่นวิธีการศึกษา ตรวจหา CD36 บนเกล็ดเลือดจำนวน 598 ตัวอย่าง และบนโมโนไซต์จำนวน 36 ตัวอย่างด้วยวิธี flow cytometry และศึกษา variant ของยีน CD36 โดยทำ DNA sequencing รายที่ให้ผล CD36 deficiencyผลการศึกษา จากการศึกษาตรวจหาฟีโนไทป์ CD36 บนเกล็ดเลือดพบว่าเป็น CD36 positive (Nak[superscript a] positive) จำนวน 588 ตัวอย่าง (98.33%) และเป็น CD36 deficiency (Nak[superscript a] negative) จำนวน 10 ตัวอย่าง 6 ตัวอย่าง พบให้ผล positive จำนวน 5 ตัวอย่ง เป็น CD36 deficiency type II (ขาด CD36 บนเกล็ดเลือดอย่างเดียว) และให้ผล negative จำนวน 1 ตัวอย่าง เป็น CD36 deficiency type I (ขาด CD36 ทั้งบนเกล็ดเลือดและบน monocyte) พบ variant ที่น่าสนใจได้แก่ 332-333 delCA ในตัวอย่าง CD36 deficiency type I และ 287 G>C และ c.-132A>C ในส่วน intron ใกล้ส่วน start codon จากการศึกษานี้บ่งบอกได้ว่าแอนติเจน CD36 (Nak[superscript a]) อาจก่อให้เกิดปัญหาทางคลินิกในคนไทยได้ เนื่องจากผู้ที่เป็น CD36 deficiency type I สามารถสร้างแอนติบอดีต่อ CD36 ได้ จึงควรจัดทำฐานข้อมูลบริจาคที่เป็น CD36 deficiency เพื่อจัดหาเกล็ดเลือดให้ผุ้ป่วยที่มีแอนติบอดีได้อย่างเหมาะสม

Objective: This research aimed to study CD36 (Nak[superscript a]) phenotype and type of variant of CD36 gene in platelet apheresis donors from the National Blood Centre, Thai Red Cross Society in order to be used as a preliminary data in its clinical significance and to develop other methods for CD36 detection.Methods: This research studied CD36 phenotyping on 598 platelet samples and 36 monocyte samples obtained from platelet apheresis donors. All samples were phenotyped by flow cytometry and detected CD36 variants by DNA sequencing method.Results: CD36 positive (Nak3 positive) was found in 588 samples (98.33%) while CD36 deficiency (Nak[superscript a] negative) was found in 6 samples (1.67%). CD36 deficiency was found in 6 monocyte samples; 5 samples were CD36 deficiency type II (Lacking CD36 expression on PLTs only) while 1 sample was CD36 deficiency type I (Lacking CD36 expression on PLTs and monocytes). This study found interesting variants which are 332-333 delCA in CD36 deficiency type I, and 287 G>C and c.-132A>C in intron which were near the start codon. This study found that Nak[superscript a] antigen may cause clinical problems in Thai population because CD36 deficiency type I person can produce antibodies against CD36 (Nak[superscript a]) antigen. Therefore, CD36 deficiency database should be established in order to provide suitable platelets for patient who have these antibodies.