การศึกษาสภาวะที่เหมาะสมต่อการผลิตสารยับยั้งแบคทีเรียโดยเชื้อราจากป่าชายเลน

Abstract

นำเชื้อราที่คัดแยกจากป่าชายเลนทั้งหมด 30 ไอโซเลต มาเพาะเลี้ยงบนอาหารเพาะเลี้ยงเชื้อ Potato dextrose broth (PDB) แล้วนำน้ำเลี้ยงเชื้อรามาทดสอบการยับยั้งแบคทีเรียก่อโรค จำนวน 8 สายพันธุ์ ได้แก่ Bacillus cereus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, S. haemolyticus, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. และ Vibrioparahaemolyticus พบว่าราเส้นใยที่คัดแยกได้มีความสามารถยับยั้งเชื้อแบคทีเรียก่อโรคได้ดี คือ ไอโซเลต MBK 002, MPU 005 และ MSA 003 โดยแสดงฤทธิ์ยับยั้งแบคทีเรียแกรมบวก (B. cereus และ S. aureus) ได้ดีกว่าแบคทีเรีย แกรมลบ คัดเลือกราเส้นใยทนเค็มที่ให้ผลการทดสอบเบื้องต้นดีที่สุด คือ MBK 002,MPU 005 และ MSA 003 จากทำการ ศึกษาความเข้มข้นของเกลือ แหล่งคาร์บอน และแหล่งไนโตรเจนที่เหมาะสมต่อการสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ พบว่าเชื้อราทั้ง 3 ไอโซเลต สร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สูงในสภาวะที่มีความเข้มข้นเกลือ เท่ากับ 0-5 เปอร์เซ็นต์ และเมื่อใช้ sucrose และ glucose เป็นแหล่งคาร์บอน sodium nitrate,tryptone และ yeast extract เป็นแหล่งไนโตรเจน ตามลำดับ สารสกัดหยาบ เอทิลอะซิเตรทของเชื้อราป่าชายเลนแต่ละชนิดมีฤทธิ์ยับยั้งแบคทีเรียก่อโรคที่แตกต่างกัน โดยมีโซนยับยั้งอยู่ในช่วง 7.4-17.0 มิลลิเมตร เมื่อทดสอบด้วยวิธี disc diffusion test และมีค่าความเข้มข้นต่ำสุดที่มีฤทธิ์ในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย (Minimum inhibitory concentration:MIC) อยู่ในช่วง 1.25-5 มิลลิกรัมต่อมิลลิเมตร เมื่อทดสอบด้วยวิธี microtube dilution method

Thirty isolate of mangrove fungi were cultured on Potato dextrose broth (PDB) and tested for antibacterial activity by agar well diffusion method against 8 pathogen bacteria (Bacillus cereus, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, S. haemolyticus, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. and Vibrio parahaemolyticus). The results showed that 3 isolates inhibited pathogen bacteria. Bioactive compound from molds inhibited Gram positive bacteria (B. cereus and S. aureus) better than Gram negative bacteria. Isolate of MBK 002, MPU 005 and MSA 003 was demonstrated optimization of salts concentration, carbon sources and nitrogen sources. The results showed that MBK 002, MPU 005 and MSA 003 can growth in medium with salts concentration at 0-5 percent, sucrose and glucose as carbon source and has sodium nitrate, tryptone and yeast extract as nitrogen source to optimum the bioactive compound production. Antibacterial activities of ethyl acetate of culture medium extract were tested against pathogen bacteria by disc diffusion test. Crude extract showed antibacterial activity against tested organisms with the zone of inhibition ranging from 7.4-17.0 mm. The microtube dilution method gave minimum inhibitory concentrations (MIC) rang of 1.25-5 mg/ml.